破外女13一14在线观看,啊灬啊灬啊灬快灬深用力,国产99久久九九精品无码,一本一道人人妻人人妻ΑV

您好!歡迎訪問(wèn)上海滬崢生物科技有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

15001863771

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 用于RNAi的慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序

用于RNAi的慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序

更新時(shí)間:2020-03-18      點(diǎn)擊次數(shù):3015

慢病毒包裝簡(jiǎn)要程序:
以六孔板中的1孔為例,每個(gè)樣品需要1×10∧6個(gè)293FT細(xì)胞。
1、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達(dá)質(zhì)粒以及250μl的無(wú)血清Opti MEM。輕柔混勻,室溫孵育5min。
2、取1.5ml滅菌EP管,取9μl 脂質(zhì)體2000l溶于250μl無(wú)血清Opti-MEM I培養(yǎng)基中。輕柔混勻,室溫孵育5min。
3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min
4、用胰酶消化并記數(shù)293FT細(xì)胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
5、在六孔板中每孔,加入1ml含血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,再加入DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。
6、將1ml重懸的293FT細(xì)胞(1×10∧6個(gè)細(xì)胞/ml)加入到平板中。37℃CO2孵箱中孵育過(guò)夜。
7、移除含有DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物的培養(yǎng)基移除,代之以DMEM(含丙酮酸鈉和非必須氨基酸)。
7、轉(zhuǎn)染后48-72h收獲含病毒的上清。3000 rpm 離心20min,去除沉淀。
8、病毒上清-80°C貯存。
包裝出來(lái)的慢病毒對(duì)NIH/3T3細(xì)胞達(dá)90%以上感染效率

掃一掃,關(guān)注微信
地址:上海市,浦東新區(qū),懿行路(微信和手機(jī)號(hào)同號(hào)) 傳真:86-021-68969289
©2025 上海滬崢生物科技有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備16008355號(hào)-1
荷兰女人裸体性做爰| 车子一晃一晃的就进去D乚| 扒开双腿猛进入JK校花免费网站 | 女朋友水太多进去就软了| 成品网站W灬源码1688特点| 久久久久无码国产精品一区| 老熟女BBW搡BBBB搡| 另类sm一区二区三区免费视频| 单亲与子的性关系A片| 宝贝胸罩脱了让我揉你的胸 | 夜夜高潮夜夜爽高清完整版1 | 久久久久久亚洲精品中文字幕| 国产乱人伦偷精品视频免下载 | 久久国产精品久久久久久 | 久久AV喷吹AV高潮AV欧美| 亚洲AV综合永久无码精品天堂| 婷婷国产成人精品视频小说| 玩弄老太婆BBW视频| 国产边打电话边做对白在线| 大学生高潮无套内谢视频| AAAAA级少妇高潮大片| 老师露双奶头无遮挡挤奶视频 | 国产 国语对白 露脸| 性欧美XXXXX老少交| 亚洲精品久久久久久久观小说| 女人下边被添全过视频| 小SAO货CAO得你舒服吗男男| 欧美性爱网| 成人区色情综合小说| 亚洲色大成网站WWW久久九九| 亚洲AV日韩AV永久无码下载| 久久无码人妻一区二区三区| 亚洲综合久久日日躁综合| 亚洲熟妇AV一区二区三区| 婷婷色中文字幕综合在线| 久久精品A一国产成人免费网站| 色婷婷丁香五月久久综合| 少妇扒开腿让我爽了一夜| 无码人妻丰满熟妇区五十路| 高潮搐痉挛潮喷av| 四虎永久在线精品无码|