破外女13一14在线观看,啊灬啊灬啊灬快灬深用力,国产99久久九九精品无码,一本一道人人妻人人妻ΑV

您好!歡迎訪問上海滬崢生物科技有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

15001863771

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 輕松看懂pcr實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖

輕松看懂pcr實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖

更新時(shí)間:2019-10-25      點(diǎn)擊次數(shù):6313

辛辛苦苦提完 RNA,逆轉(zhuǎn)錄后一個(gè)個(gè)孔加完引物和模板,Z后進(jìn)行 RT-PCR,你以為這樣就可以美滋滋地坐等結(jié)果了?等到一幅下面這樣的結(jié)果圖,不知道對于剛接觸 RT-PCR 的你來說內(nèi)心是否是崩潰的?

這是啥?怎么看?

別急,讓我慢慢跟你介紹,看完后你就能準(zhǔn)確的分析出你的 RT-PCR 結(jié)果了?!高@里以 7500 軟件為例進(jìn)行介紹」

1. 首先設(shè)置好內(nèi)參和對照組「在 Analysis Settings 處」,一般我們在上機(jī)前會對應(yīng)設(shè)置好的,如果設(shè)置好的話可以直接跳至第 3 點(diǎn)。如果沒有設(shè)置好的話是需要重新進(jìn)行設(shè)置。

2. 點(diǎn)擊進(jìn)去后,選擇對應(yīng)好的內(nèi)參和對照組?!冈?Relative Quantization Settings 選項(xiàng)下」

3.選擇好內(nèi)參和對照組后,我們首先看看 PCR 跑的有沒有問題,在這里大家Z常會見到的問題是在樣品池出現(xiàn)了三角形符號,如下圖:

那么這些三角形代表什么意思?沒錯(cuò),聰明的你應(yīng)該已經(jīng)想到是這個(gè)孔出現(xiàn)了問題,而三角形中的數(shù)字是幾則代表了孔中有幾個(gè)問題。具體又是什么問題呢?我們就要通過 analysis 中的 QC Summery 進(jìn)行查找。

舉個(gè)栗子,比如圖中的 A9 孔,出現(xiàn)了 2,則表示有 2 個(gè)問題,第 1 個(gè)問題如上圖所示,High standard deviation 高的標(biāo)準(zhǔn)偏差,表示可能是你上樣時(shí)導(dǎo)致的樣品復(fù)孔之間差異較大。第二個(gè)問題則是下圖中,系統(tǒng)認(rèn)定 A9 孔中的數(shù)值偏差較大,屬于異常值。

當(dāng)然,還有比較常見的問題是引物二聚體引起的雙重峰,如 A4 孔。

4. 溶解曲線「melt curve」:表示隨溫度升高 DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解程度的曲線??偟?DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半的溫度稱為熔解溫度「Tm」,不同序列的 DNA,Tm 值不同。DNA 中 G-C 含量越高,Tm 值越高,成正比關(guān)系。正如上面提到的,正常的樣品孔溶解曲線應(yīng)該是單峰的,如下圖。如果出現(xiàn)了雙峰,則要考慮是否引物設(shè)計(jì)不合理或者引物過量引起溶解曲線出現(xiàn)多峰的情況。

5. 如果前面的幾項(xiàng)都沒有太大的問題的話。Z后我們看看Z重要的結(jié)果,也就是目的基因的變化情況了。在內(nèi)參與對照組選擇沒錯(cuò)的情況下,點(diǎn)擊 gene expression 選項(xiàng),選中你想查看的樣品孔的基因表達(dá)情況。

好了,這次的 RT-PCR 看圖分析就到這里。Z后需要注意的是圖中的結(jié)果還需要輸出進(jìn)行后續(xù)的自行運(yùn)算得出結(jié)果。圖中的結(jié)果只能給出參考。但大致趨勢是相同的,如果還有童鞋想聽后續(xù)如何計(jì)算 RT-PCR 的結(jié)果及原理的話,歡迎關(guān)注下期的 RT-PCR 結(jié)果的計(jì)算原理與計(jì)算模板。

掃一掃,關(guān)注微信
地址:上海市,浦東新區(qū),懿行路(微信和手機(jī)號同號) 傳真:86-021-68969289
©2025 上海滬崢生物科技有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備16008355號-1
亚洲国产精品va在线看黑人 | 久久桃花综合桃花七七网| 国产一区二区三区在线电影| 国产又色又爽又高潮免费视频麻豆| 中国帅气体育生GARY视频| 调教 SM 重口 H文 HY| 亚洲爆乳无码一区二区三区| 无码熟妇人妻AV在线网站| 久久99国产精一区二区三区| 美人双性受H多人运动NP| 一区二区三区毛a片特级| 无码中文人妻在线一区二区三区| 狠狠色丁香婷婷久久综合麻豆| 精品无人国产偷自产在线| 正在播放老肥熟妇露脸| 无遮挡国产高潮视频免费观看| jizzjizz日本高潮喷水| 国产好大对白露脸高潮| 公交车大龟廷进我身体里视频| 久久精品国产亚洲AV麻豆蜜芽| 国产成人精品三级麻豆| 久久精品无码av一区二区三区| 部长侵犯部下属人妻A片| 东北少妇不带套对白第一次| 特级毛片WWW| 男男调教后菊撑开扩张A片| 日本无码色情三级播放| 久久午夜羞羞影院免费观看| 狼牙套加粗震动入珠套H| 久久精品人妻无码一区二区三区盗 | 扒开腿狂躁女人爽出白浆| 日韩精品在线观看| 国产99久久九九免费精品无码| 中文在线最新版天堂| 午夜福利电影| 40岁的女人私密很紧致| 中文字幕无码亚洲字幕成A人蜜桃| 制服 小说 亚洲 欧美 校园| 精品亚洲成A人片在线观看少妇 | AV无码精品一区二区三区宅噜噜| 日韩人妻无码精品A片免费不卡|